• síðu_borði

Fréttir

Javascript er nú óvirkt í vafranum þínum.Sumir eiginleikar þessarar vefsíðu virka ekki ef JavaScript er óvirkt.
Skráðu þig með tilteknum upplýsingum þínum og tilteknu lyfi sem þú hefur áhuga á, og við munum passa upplýsingarnar sem þú gefur upp við greinar í umfangsmikla gagnagrunninum okkar og senda þér PDF eintak strax í tölvupósti.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, smitsjúkdómadeild, Suzhou University First Affiliated Hospital, Suzhou City, Jiangsu héraði, 215000 Sími.æxli í meltingarvegi með 5 ára heildarlifun 14,1%.Margir sjúklingar með HCC eru greindir á langt stigi, svo snemma skimun er nauðsynleg til að draga úr dánartíðni af HCC.Auk algengra uppgötvunarvísa eins og alfa-fótópróteins í sermi (AFP), linsulektín-viðbragðs alfa-fótópróteins (AFP-L3) og óeðlilegs prótrombíns (kvítamínskorts af völdum próteins II, PIVKA-II), vökvasýnisaðferðir Sýnt hefur verið fram á að það hafi greiningargildi við uppgötvun HCC.Í samanburði við ífarandi aðgerðir, getur vökvasýni greint illkynja umbrotsefni í blóðrás.Vökvasýnisaðferðir greina æxlisfrumur í blóðrás, æxlis-DNA í blóðrás, RNA í blóðrás og exósóm og eru notuð við snemmtæka skimun, greiningu og forspármat á HCC.Í þessari grein er farið yfir sameindalíffræði og beitingu ýmissa aðferða við vefjasýni til að einangra efnileg lífmerki sem gætu verið raunhæfir kostir fyrir snemma mat á HCC til að bæta snemmbúna skimun á áhættuhópum HCC.Lykilorð: tækni til að taka vefjasýni í vökva, lifrarfrumukrabbamein, áhættuhópur.
Lifrarfrumukrabbamein (HCC) er algengt illkynja æxli í meltingarvegi, í sjötta sæti yfir ný tilvik illkynja æxla hjá bæði körlum og konum.1 Á heimsvísu er lifrarkrabbamein þriðja helsta orsök krabbameinsdauða á eftir lungna- og ristilkrabbameini, sem er 8,3% krabbameinstengdra dauðsfalla af völdum illkynja æxla.1 Horfur á HCC eru nátengdar greiningarstigi.Helstu ástæður fyrir slæmri lifun í HCC eru meinvörp í lifur, segamyndun í portbláæðum og fjarmeinvörp sem koma í veg fyrir brottnám og eru margir þessara einkenna þegar til staðar hjá sjúklingum við greiningu.
Byggt á leiðbeiningum um greiningu og meðferð eru helstu áhættuþættir fyrir þróun HCC skorpulifur, langvinn lifrarbólgu B veiru (HBV) eða lifrarbólgu C veiru (HCV) sýking, áfengisfitu lifrarsjúkdómur og óáfengur fitulifur sjúkdómur (NAFLD) ).2 Að auki eru áhættuþættir fyrir HCC meðal annars aflatoxínmengaðri fæðuinntöku, schistosomiasis, aðrar orsakir skorpulifur, fjölskyldusaga um lifrarkrabbamein, sykursýki, offitu, reykingar og lifrarskaða af völdum lyfja.35 og 45 ára áhættuhópar ættu að fara í reglulega læknisskoðun.Snemma skimun er mikilvæg snemmmeðferðaraðferð til að bæta heildarlifun sjúklinga með HCC.
Mælt er með lífmerkjum eins og AFP, AFP-L3 og PIVKA-II fyrir snemmtæka skimun á HCC3,4.Aðferðir við fljótandi vefjasýni hafa sýnt vænlegan árangur við snemmtæka greiningu og mat á meðferð.5,6 Verulegar framfarir hafa orðið í HCC vökvavefsýni, sem getur haft hærra næmi og sérhæfni en almennt notuð sermismerki eins og AFP (tafla 1).
AFP er mikið notað lífmerki í HCC og er eins og er ítarlegasta lífmerkið sem er mikið notað fyrir snemmtæka skimun, greiningu og mat á sjúkdómnum.Viðvarandi hækkað AFP gildi er talið áhættuþáttur fyrir framgangi HCC.7,8 Uppgötvunartíðni lítilla lifrarfrumukrabbameins (sHCC) eykst með þróun ómskoðunar og tölvusneiðmynda, og AFP hefur reynst sérstaklega ónæmt fyrir uppgötvun hHCC í klínískri framkvæmd.Samkvæmt afturskyggnri fjölsetra rannsókn9 fannst AFP jákvætt í 46% (616/1338) tilfella HCC og 23,4% (150/641) tilfella sHCC.Að auki eru AFP gildi hækkað hjá sjúklingum með langvinnan lifrarsjúkdóm og skorpulifur.10 Þannig hefur AFP takmörkuð skimunaráhrif fyrir sHCC.11 Samkvæmt klínískum leiðbeiningum um lifrarfrumukrabbamein í Asíu og Kyrrahafi er ekki mælt með notkun AFP.12 Klínískar vísbendingar benda til þess að PIVKA-II sé betri en AFP við meðferð á HCC og að samsetning PIVKA-II og AFP hafi hærra greiningargildi í HCC.13 Í samanburði við vefjasýni, greinir vökvasýni fyrst og fremst æxlistengd umbrotsefni í líkamsvökva (blóð, munnvatni, fleiðruvökva, heila- og mænuvökva eða þvagi) og er minna ífarandi fyrir vefi.14 Að auki geta vökvasýni endurspegla illkynja eiginleika sem ekki eru til staðar í frumæxlisvef.15 Vökvasýni eru ekki enn í prófun í klínískri starfsemi fyrir allar tegundir æxla, en greiningarmöguleikar þeirra við krabbamein vekur athygli krabbameinslækna.16 Vökvasýni getur greint æxlisfrumur í blóðrás (CTC), æxlis-DNA í blóðrás (cDNA), óbundið RNA í blóðrás (ecRNA) og exósóm.Í þessari grein munum við fjalla um eiginleika, hlutverk og beitingu ýmissa aðferða við vökvavefjasýni við snemmskoðun á áhættuhópum HCC.
Utanfrumu DNA (cfDNA) í blóðsýnum frá heilbrigðum einstaklingum var fyrst lýst árið 1948 af Mandel o.fl.17 cfDNA er frumulaust DNA brot sem er um það bil 160–180 bp að lengd, sem kemur fyrst og fremst frá eitilfrumum og mergfrumur.ctDNA er sérstakt stökkbreytt DNA brot sem æxlisfrumur gefa út í útlæga blóðið, sem táknar erfðafræðilegar upplýsingar æxlisfrumna eftir ákveðna meinalífeðlisfræðilega ferla, þar á meðal drep, frumudauða og útskilnað.Hlutfall ctDNA af heildar cfDNA er mjög breytilegt eftir æxlisgerð og cDNA brot eru venjulega minni en 167 bp að lengd.18 Rannsókn Underhill sýndi að cfDNA brot eru almennt styttri en venjulegt cfDNA.19 Samanborið við heilbrigða einstaklinga er heildarlengd cfDNA brota í blóði krabbameinssjúklinga styttri og því er hægt að nota cfDNA sem vísbendingu um snemma æxlisleit.Auðgun á tilteknum undirhópum af lengd cfDNA brota getur bætt greiningu á cDNA sem tengist föstu æxlum sem ekki eru meinvörpuð.Rannsóknir hafa sýnt að ctDNA er að finna í yfir 75% af langt gengnu krabbameini í brisi, ristli, þvagblöðru, meltingarvegi, lifur, eggjastokkum, brjóstum, sortuæxlum og höfuð- og hálskrabbameini.20,21 Hins vegar fer magn ctDNA í blóði eftir staðsetningu æxlisins.22 Í rannsókn Bettegoud kom í ljós að sjúklingar með krabbamein í ristli, brjóstum, lifur, lungum og blöðruhálskirtli voru með hærra magn cDNA í blóði en önnur krabbamein.Aftur á móti var styrkur cDNA í blóði lægri hjá sjúklingum með munnkrabbamein, briskrabbamein, magakrabbamein og glioma.tuttugu og einn
Vegna þess að ctDNA inniheldur sömu erfðastökkbreytingar og frumæxlisfrumur, er hægt að nota cDNA til að greina ólíkar æxlissértækar stökkbreytingar og epigenetic breytingar, þar með talið metýleringu, hýdroxýmetýleringu, einstaka núkleótíðafbrigði og afritafjöldabreytingar.tuttugu og þrír
DNA metýlering er ein algengasta epigenetic breytingin sem leiðir til genabælingar.Í samanburði við venjulegar frumur er munur á heildarstigi metýleringar í erfðamengi æxlisfrumna, sérstaklega í metýleringu æxlisbælandi gena, sem hægt er að greina á frumstigi, sem bendir til þess að breytingar á DNA metýleringu geti verið vísbending um snemma uppgötvun æxlismyndunar.Æxlisbælandi gen sem tengjast HCC geta verið óvirkjuð með promotor metýleringu og örvar þar með æxlismyndun.24 DNA metýlering er tilvalið merki til að greina æxli snemma vegna sérhæfðar vefja, greinanlegs og aldursóháðs.Þar að auki er DNA metýlering algengari samanborið við líkamsstökkbreytingar vegna þess að það eru fleiri marksvæði og nokkrir breyttir CpG staðir á hverju svæði markgenamengisins.25 Auk margra CpG staða hefur mikill fjöldi óháðra ofmetýleraðra staða í ctDNA verið auðkenndur í DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 og RGS10.26 Xu et al.Samanburður á cfDNA sýnum frá 1098 HCC sjúklingum og 835 heilbrigðum samanburðargenum sem tengdust HCC reyndust vera í sterkri fylgni við samsvarandi plasma cDNA metýleringarmerki.25 Byggt á rannsóknarstofugreiningu var þróað forspárlíkan sem innihélt 10 metýleringarmerki með næmi og sérhæfni upp á 85,7% og 94,3% í sömu röð og þessi merki voru í mikilli fylgni við æxlismassa, æxlisstig og svörun við meðferð.Þessar niðurstöður benda til þess að notkun cDNA metýleringarmerkja lofar góðu við greiningu, eftirlit og horfur á HCC.Í metýleringarlíkani sem samanstendur af þremur afbrigðilega metýleruðum genum (APC, COX2, RASSF1A) og einu miRNA (miR203) sem Lu et al27 kynnti, var næmi og sérhæfni líkans 27 til að greina HBV-tengt HCC sambærileg.80%.Að auki gæti líkanið greint 75% ógreindra HCC sjúklinga með AFP gildi 20 ng/ml.Genið fyrir Ras-tengda lénsfjölskylduna 1A prótein (RASSF1A) er helsta endurtekna DNA röðin í erfðamengi mannsins.Araujo o.fl.komst að þeirri niðurstöðu að ofmetýlering á RASSF1A hvataefni gæti verið dýrmætt lífmerki fyrir snemmtæka skimun á HCC og hugsanlegt sameindamarkmið fyrir epigenetic meðferð.28 Í einni rannsókn fannst RASSF1A hvata ofmetýlering í sermi hjá 73,3% sjúklinga með HCC.29 Langt blandað núkleótíð frumefni 1 (LINE-1) er annar mjög virkur endurflutningsmiðill.Ofmetýlering LINE-1 fannst í DNA 66,7% HCC sermissýna og tengdist snemma endurkomu og lélegri lifun eftir róttækan brottnám.29 Ofmetýlering er algengt erfðafræðilegt ferli sem gegnir einstöku hlutverki í þróun skorpulifurs og HCC.30 Aftur á móti er hýdroxýmetýlering afmetýlunarferli sem framkallar endurvirkjun og tjáningu gena og hægt er að greina 5-hýdroxýmetýlsýtósín (5-hmC) vöruna í þessu ferli til að bera kennsl á æxli.Metýlering og hýdroxýmetýlering cDNA tengjast æxlismyndun og getur stuðlað að snemmbúinni skimun HCC.Í rannsókn á 2554 einstaklingum fundust 31 erfðamengi-breitt 5-hmCs í cfDNA sýnum og 32 gen voru auðkennd með því að bera saman 5-hmC raðir í HCC sjúklingum og áhættuhópum eins og þeim sem eru með langvinna sjúkdóma.Greiningarlíkön lifrarsjúkdóma.og skorpulifur.Þetta líkan var betra en AFP við að greina HCC frá vefjum sem ekki voru æxli.
Stökkbreytingar á kóðunarsvæðum geta leitt til umritunarfrávika, sem getur leitt til breytinga á próteinröðum og að lokum krabbameins.Einstök núkleótíðafbrigði eru mikilvæg erfðafræðileg merki fyrir snemma æxlisskimun vegna mikils áreiðanleika vefja og mikillar æxlis- og vefjasérhæfni.Fjölmargar HCC-tengdar rannsóknir þar sem notaðar eru næstu kynslóðar raðgreiningu (NGS) fyrir exome og heilt erfðamengi raðgreiningu krabbameins hafa greint algeng stökkbreytt frumugn eins og TP53 og CTNNB1, auk nokkurra þar á meðal ARID1A, MLL, IRF2.Nýju genin, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 og JAK1 sýna miðlungs stökkbreytingartíðni. Greining á stökkbreyttum genavirkni bendir til þess að breytingar á litningabreytingum, Wnt/β-catenin og JAK/STAT merkjaflutningi, P53-frumuhringrásarferilinn, epigenetic modifiers, oxunarálagsferlar, PI3K/AKT/MTOR leiðin og RAS/RAF/ MAPK kínasa ferill gegnir mikilvægu hlutverki í krabbameinsmyndun HCC.32,33 Í rannsókn þar sem æxlistengdar stökkbreytingar greindust komust Huang o.fl. að tíðni æxlistengdra stökkbreytinga háð ctDNA var 19,5% og sérhæfni var 90%. .34 Að auki voru sjúklingar sem fengu æðainnrás líklegri til að hafa stökkbreytingar í ctDNA (P=0,041) og styttri lifun án endurkomu (P<0,001). Greining á stökkbreyttum genavirkni bendir til þess að breytingar á litningabreytingum, Wnt/β-catenin og JAK/STAT merkjaflutningi, P53-frumuhringrásarferilinn, epigenetic modifiers, oxunarálagsferlar, PI3K/AKT/MTOR leiðin og RAS/RAF/ MAPK kínasa ferill gegnir mikilvægu hlutverki í krabbameinsmyndun HCC.32,33 Í rannsókn þar sem æxlistengdar stökkbreytingar greindust komust Huang o.fl. að tíðni æxlistengdra stökkbreytinga háð ctDNA var 19,5% og sérhæfni var 90%. .34 Að auki voru sjúklingar sem fengu æðainnrás líklegri til að hafa stökkbreytingar í ctDNA (P=0,041) og styttri lifun án endurkomu (P<0,001).Greining á stökkbreyttum genavirkni bendir til þess að breytingar á endurgerð litninga, Wnt/β-catenin og JAK/STAT boð, P53 frumuhringrás, epigenetic modifiers, oxunarálagsferlar, PI3K/AKT/MTOR ferli og RAS/RAF/MAPK kínasa ferlar spili mikilvægt hlutverk í HCC æxlismyndun.32,33 Í rannsókn sem fann æxlistengdar stökkbreytingar, Huang o.fl.komist að því að tíðni ctDNA-háðra æxlistengdra stökkbreytinga var 19,5% og sérhæfni var 90%..34 кроме тог, п пациент? .34 Að auki höfðu sjúklingar með æðainnrás fleiri stökkbreytingar í cDNA (P=0,041) og styttri sjúkdómslausa lifun (P<0,001).Virk greining á stökkbreyttu genum leiddi í ljós endurgerð litninga, Wnt/β-catenin og JAK/STAT boð, P53 frumuhringrásina, epigenetic modifiers, oxunarálagsferlið, PI3K/AKT/MTOR ferilinn og RAS/RAF/MAPK kínasa ferill gegnir mikilvægu hlutverki í krabbameinsmyndun HCC. 32,33 在 一 项 检测 到 肿瘤 相关 突变 的 研究 中 , huang 等 人 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 依赖于 依赖于 依赖于 依赖于 的 频率 为 为 为 侵犯 的 更 有 为 可能 可能 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生.突变(P=0,041)和更短的无复发生存期(P<0,001)。 32.33 在 一 项 检测 到 相关 突变 的 研究 , huang 等 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 依赖于 ctDNA 的 为 为 19,5% , 特异性 为 90% .34 此外 经历 血管 侵犯 的 更 更 可能 发生 CTDNA 突变 (P = 0,041) 和 更 更短的无复发生存期(P<0,001)。32,33 Í rannsókn sem fann æxlistengdar stökkbreytingar, Huang o.fl.komst að því að stökkbreytingar tengdar æxlum voru 19,5% háðar cDNA með sérhæfni upp á 90% 34. Auk þess voru sjúklingar sem höfðu gengist undir æðainnrás líklegri til að þróa cDNA.мутация (P = 0,041) og более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). stökkbreytingu (P=0,041) og styttri lifun án sjúkdóma (P<0,001).Annað algengt HCC drifgen er TP53, sem hefur stökkbreytingartíðni sem er yfir 30%.Rannsóknir hafa sýnt að tíðni TP53 stökkbreytinga í ctDNA í blóði og þvagi er á bilinu 5% til 60%.35 Rannsókn Johans sýndi að ctDNA stökkbreytingarrófið í seint HCC hefur svipaða stökkbreytingatíðni og snemma HCC, þar á meðal TERT hvata (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), stökkbreytingar í AXIN1., ARID2, KMT2D og TSC2 (6% hvor).36 β-catenin (CTNNB1) krabbameinsgenið gegnir mikilvægu hlutverki í Wnt boðleiðinni.Umritunarvirkjarinn CTNNB1 getur stuðlað að tjáningu gena, sem getur leitt til frumufjölgunar, hömlunar á frumudauða og æðamyndun.CTNNB1 getur einnig haft samskipti við TERT til að framkalla umbreytingu lifrarfrumna.33 TERT-hvatarinn er oft stökkbreyttur í sumum föstum æxlum.Breytingar á TERT, ein af elstu erfðabreytingum í illkynja umbreytingu á HCC, geta leitt til endurvirkjunar telómerasa í skorpulifur lifrarfrumum og getur stuðlað að fjölgun og komið í veg fyrir öldrun.Tilkynnt hefur verið um stökkbreytingar í 33-37 TERT-hvatanum sem eiga sér stað hjá 59-90% sjúklinga með fjölgun lifrarhnúða og snemma HCC og tengjast lifun.38
Copy number changes (CNA) eru mikilvæg undirtegund líkamsstökkbreytinga.Rannsóknir hafa sýnt að útbreidd og miðlæg byrði CNA er erfðafræðileg undirskrift sem getur spáð fyrir um íferð og útilokun æxlisónæmis í sumum tegundum krabbameins.39 Virk íferðarboð, mikil frumueyðandi virkni, alvarleg bólga og erfðamerki tengd mótefnavakakynningu í HCC.Greining á gagnafjölda fjölbrigða eins núkleótíða hjá 477 einstaklingum leiddi í ljós litla álag á miðtaugakerfið.Aftur á móti sýndu litningaóstöðug æxli með mikið CNA álag merki um ónæmishöfnun og tengdust fjölgun, DNA viðgerð og truflun á TP53.Xu o.fl.sýndi að HCC hópurinn var með hærri CNA stig en langvinna lifrarsjúkdóma hópinn.40 Með því að nota heilar erfðagreiningar á einni frumu, kom í ljós að CNAs birtust snemma í lifrarkrabbameinsmyndun og haldast tiltölulega stöðugar meðan á æxlisframvindu stendur.41 Chung o.fl.komst að því að cfDNA gildi voru marktækt hækkuð hjá HCC sjúklingum og að CNA í cfDNA um allt erfðamengi voru mikilvæg óháð forspár í HCC sjúklingum sem fengu meðferð með sorafenib.42 Sjúklingar með hærri CNA-byrði voru líklegri til að fá framgang sjúkdóms og dauða en þeir sem voru með lægri CNA-byrði.Ollerich o.fl.komist að því að hægt er að nota óstöðugleikavísitölu afrita (CNI) til að meta CNA í cfDNA krabbameinssjúklinga.Þeir tóku fram að sjúklingar með langt gengið krabbamein höfðu marktækt hærra CNI stig en samanburðarhópur, sem metur svörun sjúklinga við almennri krabbameinslyfjameðferð og ónæmismeðferð.43 Þessar niðurstöður benda til þess að CNA sem finnast í fljótandi vefjasýnissýnum geti þjónað sem forspárvísbendingar hjá sjúklingum með langt gengið krabbamein.HCC á bakgrunni kerfisbundinnar meðferðar.
Eins og er er hægt að skipta aðferðunum sem notaðar eru til að greina ctDNA í markvissar og ómarkvissar aðferðir.Í stuttu máli eru markvissar aðferðir eins og stafræn pólýmerasa keðjuverkun (dPCR), BEAMing digital PCR, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq og Tam-Seq mjög viðkvæm fyrir fyrirfram skilgreindum genum.Aðferðir utan markmiðs eins og raðgreiningu í heilu erfðamengi og NGS veita yfirgripsmikla sýn á allt erfðafræðilegt landslag.44 Í samanburði við markspjöld getur raðgreining heils erfðamengis greint ekki aðeins punktstökkbreytingar og innsetningar, heldur einnig endurröðun og afritafjöldaafbrigði.horfur, og CTC og cfDNA eru góðar vísbendingar sem hægt er að nota fyrir kraftmikið eftirlit með HCC.45 Að auki getur cfDNA greining verið gagnlegri við að greina HCC.Yan o.fl.sýndi að cfDNA í plasma sjúklinga með HCC var marktækt hærra en hjá sjúklingum með lifrartrefjun og heilbrigða viðmiðunarhópa.Í samanburði við AFP er búist við að ctDNA sé betra skimunarmerki fyrir snemma HCC.46 Í framsýnni rannsókn á 47 vökvasýnum sem prófuðu cfDNA og prótein í þýði, var sýnt fram á að þau skila árangri við að greina sjúklinga með HCC frá sjúklingum án HCC.Í eftirfylgni með 331 eðlilegum og AFP-neikvæðum sjúklingum með ómskoðun var næmi og sérhæfni cfDNA til að greina HCC 100% og 94% í sömu röð, svo cDNA gat greint HCC hjá einkennalausum HBsAg sermisjákvæðum einstaklingum.Í Yeo48 rannsókninni fannst há tíðni (92,5%) ofmetýleringar á RASSF1A virkninni hjá sjúklingum með HCC.Að auki, Xu et al.búið til greiningarlíkan til að spá fyrir um HCC með því að nota hóp af sértækum metýleringarmerkjum með sérhæfni og næmi 90,5% og 83,3%, í sömu röð.Spjaldið gerir kleift að greina sjúklinga með HCC frá sjúklingum með aðra lifrarsjúkdóma, sem er betra en AFP.Þeir komust einnig að því að eðlileg viðmið sem reyndust jákvætt gætu haft áhættuþætti fyrir HCC, svo sem HBV sýkingu eða sögu um áfengisnotkun.25 Við gerum ráð fyrir að áhættuþættir fyrir HCC geti stuðlað að ofmetýleringu cfDNA, sem síðan stuðlar að framgangi HCC, og því gæti cfDNA gegnt lykilhlutverki í skimun fyrir áhættuhópum.Cai o.fl.draga saman allt svið ctDNA stökkbreytinga og bjóða upp á öfluga stefnu til að meta æxlisbyrði sjúklinga.49 Þessi aðferð getur greint æxlismyndun að meðaltali 4,6 mánuði fyrir breytingu á myndgreiningu og hefur sýnt betri greiningarárangur samanborið við lífmerki í sermi AFP, AFP-L3 og PIVKA-II.Sýnt hefur verið fram á greiningargildi cDNA prófunar þegar myndmat er ekki tiltækt, þannig að cDNA próf er mikilvægt við greiningu á snemma HCC í áhættuhópum.Nýlega notuðu vísindamenn NGS tækni til að greina vísbendingar um fjölbreytileika erfðabreytileika (þar á meðal 5-hýdroxýmetýlsýtósín, 5′-mótíf, sundrungu, kjarnaspor, HIFI) í 3204 klínískum sýnum og cfDNA.50 Endurvottuð HIFI líkön með þremur óháðum lestar-, prófunar- og prófunarsettum sýndu stöðugan og áreiðanlegan mismunun milli HCC og non-HCC þýða með 95,79% og 95,42% næmi í HCC-sértækum prófum og prófunarsettum, í sömu röð.Kynin voru 95,00% og 97,83%, í sömu röð.Greiningargildi HIFI aðferðarinnar er hærra en AFP til að greina HCC frá skorpulifur.Að auki er ctDNA einnig notað í skurðaðgerð.Atsushi o.fl.ákvarðað sermisþéttni ctDNA fyrir aðgerð hjá sjúklingum með HCC og komst að því að endurtekningartíðni og meinvörp utan lifur í cDNA jákvæða hópnum voru marktækt hærri en í cDNA neikvæða hópnum og cDNA gildi voru marktæk fylgni.með æxlisframvindu.51 Þar sem ctDNA er mjög viðkvæmt lífmerki getur það sagt fyrir um getu HCC til að ráðast inn í skip.Wang o.fl.framkvæmd heilar erfðamengisraðgreiningar á 46 sjúklingum með HCC og fjölþáttagreining sýndi að þröskuldsgildi samsætutíðni cDNA afbrigðisins fyrir innrás í öræðar er 0,83%, næmi 89,7% og sértækni 80,0%.óháður áhættuþáttur fyrir innrás í æðaæða í skurðtækum HCC, sem bendir til þess að cDNA geti hjálpað til við að leiðbeina bestu meðferð.Niðurstaðan er sú að ctDNA tengist fullkomlega tilkomu og þróun HCC og er hægt að nota það við snemmtæka skimun, skurðaðgerðarmat og eftirlit með sjúkdómum.
CTC eru illkynja frumur sem unnar eru úr frumæxlum eða meinvörpum sem meinvarpa í blóðrásina.Æxlisfrumur seyta matrix metalloproteinasa (MMP), sem brjóta niður grunnhimnuna, sem gerir æxlisfrumum kleift að fara beint inn í blóð og eitlaæðar.Hins vegar er flestum CTCs útrýmt með anoikis, ónæmisárás eða klippiálagi.53 Þekjuvefja-mesenchymal umskiptin (EMT) gerir kleift að einangra CTCs auðveldlega frá frumæxlisvef, ráðast inn í háræðar og öðlast verulega bætta lifun, meinvörp, ífaravirkni og lyfjaþol.Rannsóknir hafa sýnt að það er mikil misleitni meðal hinna ýmsu æxlisfrumna í frumæxlum með meinvörpum.Þannig getur CTC greining leitt til alhliða skilnings á misleitni æxlisfrumna.54
Sértæk merki fyrir HCC-tengda CTC eru meðal annars glypican-3 (GPC3), asialoglycoprotein viðtaka (ASGPR), þekjufrumuviðloðunarsameind (EpCAM) og stofnfrumu-tengd merki eins og CD44, CD90, 55 og millifrumuviðloðunarsameind 1 (ICAM1).) .56 GPC3 merkið er frumuhimnufestað prótein sem er klínískt notað til meinafræðilegrar greiningar og persónugreiningar á HCC.57 Tjáning á GPC3 er algengari í HCC æxlisfrumum með miðlungs og lága aðgreiningu og stuðlar að flutningi utan lifrar;að auki bendir tilvist GPC3+ CTCs á HCC með meinvörpum.58 ASGPR er yfirhimnuprótein sem er aðeins tjáð á yfirborði lifrarfrumna og er mjög tjáð í vel aðgreindum HCC.EpCAM er eitt mest notaða himnutengda próteinið til að fanga CTCs.EpCAM hefur verið skilgreint sem yfirborðsmerki HCC frumna með stofnfrumueiginleika,59 sem tengist ýmsum klínískum meinafræðilegum einkennum HCC, svo sem innrás í æðar, metið AFP gildi og langt stigi lifrarkrabbameins á Barcelona sjúkrahúsinu (BCLC).60 CTC EMT svipgerðin er mjög meinvörpuð.54 EMT ferli í CTC stuðla að HCC meinvörpum.Tjáning EMT merkja eins og vimentin, twist, E-box sink fingurbinding (ZEB) 1, ZEB2, snigill, snigill og E-cadherin hefur verið rannsökuð hjá lifrarafleiddum CTCs frá HCC sjúklingum.58 CanPatrol™ kerfið þróað af Cheng [61] flokkaði CTC í þrjá svipgerða undirhópa byggða á aðallega tjáðum merkjum: þekjusvipgerð (EpCAM, CK8/18/19), mesenchymal svipgerð (vímentín, spóluð) og blönduð svipgerð.Hjá 176 sjúklingum var heildar CTC betri en AFP til að greina HCC frá góðkynja lifrarsjúkdóm.AUC gildi fyrir heildar CTC, AFP og samanlagt heildar CTC og AFP voru 0,774 (95% CI, 0,704–0,834), 0,669 (95% CI, 0,587–0,750) og 0,821 (95% CI, 0,756–0,856–0. ).), í sömu röð.CTC flokkun byggð á EMT getur spáð fyrir um HCC greiningu, snemmbúna endurkomu, meinvörp og styttri heildartíma.
Eins og er eru aðferðir til að greina CSCs meðal annars eðlisfræðilegar aðferðir og líffræðilegar aðferðir.Eðlisfræðilegar aðferðir, oft kallaðar auðgun byggðar á lífeðlisfræðilegum eiginleikum, eru aðallega háðar eðliseiginleikum CSC, svo sem stærð, þéttleika, hleðslu, hreyfanleika og aflögunarhæfni.Það fer eftir eðliseiginleikum, það eru ýmsar aðferðir eins og síunartengd kerfi, dielectrophoresis o.fl. Sú síðarnefnda, einnig þekkt sem ónæmissækni byggð auðgun, byggist aðallega á mótefnavaka-mótefnabindingu þar sem aðferðin notar mótefni gegn æxlissértækum lífmerkjum eins og EpCAM, ASGPR, húðþekjuvaxtarþáttur 2 (HER2), blöðruhálskirtilsmótefnavaka (PSA), pancytokeratín úr mönnum (P-CK) og karbamóýlfosfatsyntasa 1 (CPS1).62 Önnur tegund, sem kallast ekki auðgunaraðferðin, notar frumuflæðismælingu til að greina CTC frá hvítfrumum byggt á hærra hlutfalli og stærð kjarna og frumu.Eins og er er eina FDA-samþykkta prófið til að greina CTCs Cell-Search™ kerfið, sem notar EpCAM frumuyfirborðsmerkið. Hins vegar gæti sameinuð CTC greining sem byggir á merkjum aukið jákvæðnihlutfallið.54 Blanda af mótefnum gegn ASGPR og CPS1 náði CTC greiningarhlutfalli upp á 91% hjá HCC sjúklingum.63 Zhang o.fl. notuðu CTC-Chip með mótefnum gegn ASGPR, P -CK og CPS1, og aðgreindu HCC sjúklinga frá þeim sem eru með góðkynja lifrarsjúkdóm eða krabbamein sem ekki er HCC á 100% hlutfalli.64 Rannsókn Wang greindi EpCAM+ CTC hjá 60% af 42 HCC sjúklingum og fann marktæk fylgni milli beggja jákvæðninnar. tíðni og fjölda CTCs með TNM stigi.65 Guo et al komust að því að CTC-afleidd PCR skor var hækkað hjá 125/171 (73%) sjúklingum sem höfðu AFP gildi <20 ng/ml með næmi 72,5% og a sérhæfni upp á 95,0%, samanborið við 57,0% og 90,0% fyrir AFP við 20 ng/ml skerðingu.66 Samsetning AFP og CTC getur bætt HCC uppgötvun.45 Talið er að CTCs hafi forskot á AFP við snemma skimun hópa í mikilli áhættu fyrir HCC. Hins vegar gæti sameinuð CTC greining sem byggir á merkjum aukið jákvæðnihlutfallið.54 Blanda af mótefnum gegn ASGPR og CPS1 náði CTC greiningarhlutfalli upp á 91% hjá HCC sjúklingum.63 Zhang o.fl. notuðu CTC-Chip með mótefnum gegn ASGPR, P -CK og CPS1, og aðgreindu HCC sjúklinga frá þeim sem eru með góðkynja lifrarsjúkdóm eða krabbamein sem ekki er HCC á 100% hlutfalli.64 Rannsókn Wang greindi EpCAM+ CTC hjá 60% af 42 HCC sjúklingum og fann marktæk fylgni milli beggja jákvæðninnar. tíðni og fjölda CTCs með TNM stigi.65 Guo et al komust að því að CTC-afleidd PCR skor var hækkað hjá 125/171 (73%) sjúklingum sem höfðu AFP gildi <20 ng/ml með næmi 72,5% og a sérhæfni upp á 95,0%, samanborið við 57,0% og 90,0% fyrir AFP við 20 ng/ml skerðingu.66 Samsetning AFP og CTC getur bætt HCC uppgötvun.45 Talið er að CTCs hafi forskot á AFP við snemma skimun hópa í mikilli hættu á HCC.Hins vegar getur merkjabundin samsett uppgötvun CTCs aukið hlutfall jákvæðra niðurstaðna.54 Blanda af and-ASGPR og CPS1 mótefnum náði CTC greiningartíðni upp á 91% hjá sjúklingum með HCC.63 Zhang o.fl.notaði CTC-Chip með mótefnum gegn ASGPR, P-CK og CPS1, og greindi einnig sjúklinga með HCC frá þeim með góðkynja lifrarsjúkdóma eða non-HCC með 100% hlutfalli.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. tíðni og fjöldi CTCs með TNM stigi.65 Guo o.fl. komust að því að PCR frá CTCs var hækkað hjá 125/171 (73%) sjúklingum sem voru með AFP gildi <20 ng/ml með næmi 72,5% og sértækni á 95,0% samanborið við 57,0% og 90,0% fyrir AFP við 20 ng/ml mörk.66 Samsetning AFP og CTC getur bætt greiningu á HCC.45 CTC eru talin hafa forskot á AFP við snemmskoðun hópa.með mikla hættu á HCC.Hins vegar getur merkjabundin samsett greining á CTCs aukið hlutfall jákvæðra niðurstaðna.54 Blanda af and-ASGPR og CPS1 mótefnum náði 91% CTC greiningartíðni hjá sjúklingum með HCC.63 Zhang o.fl.notaði CTC flögur með mótefnum gegn ASGPR, P-CK og CPS1 og aðgreindu sjúklinga með HCC frá góðkynja lifrarsjúkdómum og non-HCC með 100%.64 Rannsókn Wang greindi 60% EpCAM+ CTC hjá 42 HCC sjúklingum og fann marktæka fylgni á milli tíðni og fjölda CTC á TNM stigi. 65 Guo 等 人 发现 , 在 AFP 水平 <20 ng/ml 的 125/171 (73%) 名 患者 中 , CTC 衍生 的 PCR 评分 升高 , 敏感性 为 72,5%, 特异性 为 95,0%, 而 AFP 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 72,5%值为20 ng/mL 时的特异性为为57.0% 和90.0%。 65 guo 等 人 发现 在 在 在 水平 <20 ng/ml 的 125/171 (73%) 名 患者 , , CTC 衍生 PCR 评分 , 敏感性 为 为 72,5%为 95,0%, AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 为 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 为 20ng/ml 时 的 特异性 为 57,0% 和 90,0%。65 Guo o.fl.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. komist að því að hjá 125/171 (73%) sjúklingum með AFP gildi <20 ng/ml hækkuðu CTC-afleidd PCR gildi með næmi 72,5% og sérhæfni 95,0%, en AFP var við cut-off sérhæfni var 20 ng/ml.ml var 57,0% og 90,0%.66 Samsetning ORP og CTC bætir greiningu á HCC.Talið er að 45 CTCs séu betri en AFP í snemmtækri skimun á áhættuhópum HCC.Þannig, fyrir CTC-jákvæða og áhættuhópa HCC, ætti CTC-próf ​​að vera reglulega sameinað með ómskoðun og AFP-greiningu.Hins vegar eru CTCs taldir mikilvægir spár um meinvörp og endurkomu æxlis og ekki er sjálfstætt mælt með því að greina CTCs sem greiningartæki.62 Þess vegna gæti CTC virkað sem betri forspárlífmerki en önnur merki sem nú eru notuð. Zhou o.fl. komust að því að sjúklingar með aukinn fjölda EpCAM+ CTCs og reglubundinna T frumur sýndu meiri hættu á að fá endurkomu HCC, en þeir sem voru með lágan fjölda CTCs, með endurkomuhlutfall upp á 66,7% á móti 10,3% (P < 0,001).67 Sambærileg rannsókn var tilkynnt af Zhong o.fl.68 Að auki komst Qi að því að 101 af 112 sjúklingum (90,81%) með HCC, þar á meðal þeir sem voru með sjúkdóm á byrjunarstigi, voru jákvæðir fyrir CTC og að mjög litlir HCC hnúðar greindust eftir 3. til 5 mánaða eftirfylgni. Zhou o.fl. komust að því að sjúklingar með aukinn fjölda EpCAM+ CTC og reglubundinna T frumur sýndu meiri hættu á að fá endurkomu HCC en þeir sem voru með lágan fjölda CTCs, með endurkomuhlutfall upp á 66,7% á móti 10,3% (P < 0,001).67 A svipuð rannsókn var tilkynnt af Zhong o.fl.68 Að auki komst Qi að því að 101 af 112 sjúklingum (90,81%) með HCC, þar á meðal þeir sem voru með sjúkdóm á byrjunarstigi, voru jákvæðir fyrir CTC og að mjög litlir HCC hnúðar greindust eftir 3 til 5 mánaða eftirfylgni. Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou o.fl. komust að því að sjúklingar með hækkuð EpCAM+ CTC og reglubundnar T frumur voru í meiri hættu á endurkomu HCC en þeir sem voru með lága CTC, með endurkomutíðni upp á 66,7% á móti 10,3% (P<0,001)67.Svipuð rannsókn var gerð af Zhong o.fl.68. Að auki komst Qi að því að 101 af 112 sjúklingum (90,81%) með HCC, þar á meðal þeir sem voru með snemma sjúkdóm, voru með CTC og að mjög litlir HCC hnúðar greindust eftir 3 til 5 mánaða eftirfylgni. Zhou 等 人 , , 与 CTC 数量 较 少 的 患者 , , EPCAM+ CTC 和 调节性 t 细胞 数量 升高 的 患者 发生 HCC 复发 的 风险 高 , 复发率 分别 为 66,7% 和 10,3% (p <0,001)。。 分别 为 66,7% 和 10,3% (p <0,001)。 Zhou 等 人 发现 与 与 与 与 数量 少 的 患者 相比 , , , , 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 相比 发生 发生 发生 发生 发生 发生 发生 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 er p <0,001)……….. Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou o.fl.komust að því að sjúklingar með hækkuð EpCAM+ CTC og reglubundnar T frumur höfðu meiri hættu á endurkomu HCC samanborið við sjúklinga með færri CTCs, með endurkomutíðni upp á 66,7% og 10,3%, í sömu röð (P <0,001).Sambærileg rannsókn var tilkynnt af Zhong o.fl.68 Að auki fann Qi að 101 af 112 HCC sjúklingum (90,81%), þar á meðal sjúklingar með snemma sjúkdóm, höfðu jákvæðar CTC niðurstöður og fundu mjög litla HCC hnúða eftir 3 heimsóknir.Athugun allt að 5 mánuðir.Þeir fundu einnig CTC hjá 12 sjúklingum með langvinna HBV sýkingu og fundu lítil HCC æxli innan 5 mánaða hjá 2 CTC-jákvæðum sjúklingum.69 Þannig er hægt að nota CTC til að spá fyrir um HCC, 70 en þeir geta verið notaðir reglulega sem forspár lífmerki.
Eins og cfDNA er cfRNA losað út í blóðrásina í gegnum ýmis kerfi.Þessar sameindir í útæðablóðinu tákna uppruna krabbameinsvefsins.Samanborið við merki sem greind eru með aðferðum sem ekki eru ífarandi, eru cfRNAs meira stjórnað, vefjasértækara og mikið í utanfrumuumhverfi.Greint hefur verið frá þýðingu og greiningargildi 71 miRNA (miRNA) í HCC í mörgum rannsóknum.miRNA eru innræn RNA sem ekki kóðar (ncRNA) sem stjórna ýmsum sameindalíffræðilegum virkni með því að hindra þýðingu markboða RNA (mRNA).miRNA eru staðsett í apoptótískum líkama sem eru hjúpaðir í exosomes, en þau geta einnig tengst sermispróteinum og lípíðum í útlægu blóði stöðugt og hægt að nota til að meta HCC.microRNA taka þátt í endurnýjun lifrar, fituefnaskipti, frumudauði, bólgu og þróun HCC.72 Oncogenic miRNA eins og miR-21, miR-155 og miR-221 eru vel þekkt í HCC.Sérstaklega gegnir miR-21 lykilhlutverki í kollagenmyndun í utanfrumufylki og bandvefsmyndun og stuðlar að lifrarkrabbameinsmyndun með því að virkja blóðmyndandi stofnfrumur.72,73 Æxlisbælandi miRNA í HCC eru miRNA-122, miRNA-29, Let-7 fjölskyldan og miRNA-15 fjölskyldan.Let-7 fjölskyldan samanstendur af mörgum æxlisbælandi miRNA sem miða á RAS fjölskylduna.MiR-15 fjölskyldan inniheldur miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 og miR-497, sem hafa sambótaraðir fyrir ákveðin mRNA.Að auki eru löng RNA (lncRNA) og hringlaga RNA (cirRNA) einnig mikilvæg fyrir snemma skimun á HCC.lncRNA tákna breiðasta flokk ncRNA, þar á meðal mRNA-lík ncRNA, og taka þátt í meingerð margra sjúkdóma í mönnum.LncRNAs gegna stjórnunarhlutverki í örumhverfi lifur og langvinnum lifrarsjúkdómum.74 CircRNA eru einnig flokkur ncRNA með margvíslega virkni í stjórnun á tjáningu gena.Nýlega hafa circRNAs verið álitin sem greiningartæki fyrir HCC.
Frítt RNA í hringrás hefur ótrúlegan stöðugleika, þar á meðal viðnám gegn hitastigi, pH og RNase, sem gerir einangrun fnRNA úr útlægu blóði minna leiðinleg með því að nota staðlaðar RNA hreinsunaraðferðir.Algengustu aðferðirnar eru NGS, microarray og RT-qPCR.NGS gerir kleift að mæla míkróRNA í gegnum erfðamengið.Þessi aðferð er hins vegar dýr og greiningin er ekki staðlað.Aftur á móti er RT-qPCR ódýrt, magnar hratt upp kjarnsýrur og býður upp á marga kosti eins og hærra næmi, meiri nákvæmni, breiðari kraftsvið og krefjast færri sýna.Örfylki eru önnur aðferð sem notuð er til að greina miRNA sem byggir á viðkvæmri og sértækri blendingu markmiRNA með viðbótar DNA-rannsóknum, 75 en greining á örfylkisgögnum er tímafrek.
Tilkynnt hefur verið um að miR-122 og Let-7 í hringrás séu hugsanlega gagnlegar við greiningu á frumstigi HCC í áhættuhópum, merki hjá sjúklingum með HBV-tengda forillkynja hnúða og snemma stigs HCC.76 Cai o.fl.komist að því að meðlimir Let-7 fjölskyldunnar (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 og miR-199a/b) eru í hættu á að fá langvarandi HCC hjá sjúklingum með lifrarbólgu.Let-7 fjölskyldan getur þjónað sem áhrifaríkur staðgengill lífmerki til að spá fyrir um þróun HCC í áhættuhópum sem tengjast langvinnri lifrarbólgu C. 77 miR-122 hefur mikla greiningarnákvæmni við að greina snemma HCC hjá sjúklingum með skorpulifur.78 MiR-107 í sermi hefur einnig verið metið á fyrstu stigum HCC, 79 og hefur sýnt góða möguleika í áhættuhópum.Zhou et al greindu frá því að hópur miRNA (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a og miR-801) geti greint HCC frá langvinnri lifrarbólgu B (CHB) og skorpulifur næmi var 79,1% og 75% og sértækni 76,4% og 91,1%, í sömu röð.80 Í HBV-tengdum HCC komumst við að því að miR150 gildi voru marktæk lækkuð samanborið við þau hjá langvinnum HBV sjúklingum án HCC (næmi 79,1%, sérhæfni 76,5%).-224 var hækkað í HCC samanborið við heilbrigða viðmiðunarhópa og undirhópagreiningar sýndu hærra gildi hjá sjúklingum með HCC sem tengist HBV.lifrarbólgu B-tengd skorpulifur og HCC sjúklingar greindu siRNA flokkara sem innihélt sjö siRNA með mismunandi tjáningu sem geta greint HCC í mismunandi samanburðarhópum;AUC svið við snemmskoðun er betra en sjálfboðaliðar AFP.Þeir komust að því að fjögur miRNA (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p og miR-365a-3p) gátu greint sjúklinga með HCC frá sjúklingum án HCC.Fimm oftjáandi miRNA (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p og miR-148a-3p) eru talin hugsanlegar HBV sýkingar í HCC, skorpulifur og CHB lífmerkjum, sérstaklega miR-34a-5p getur verið lífmerki fyrir skorpulifur,85 og getur verið hugsanlegt lífmerki fyrir snemmtæka skimun á HCC í áhættuhópum.Mest rannsakaða lncRNA í HCC er mjög virkjað í lifrarkrabbameini (HULC).Aðrar rannsóknir hafa sýnt að hægt er að nota HULC í blóðrás í HCC sjúklingum sem greiningarmerki vegna þess að þetta lncRNA er mjög uppstýrt hjá HCC sjúklingum samanborið við heilbrigða einstaklinga.71,86 Meðal annarra lnRNA er LINC00152 talið besta greiningar lncRNA vegna mikils AUC, næmis og sértækni.86 Í einni rannsókn jókst tjáning í útlægum blóði LINC00152 smám saman úr eðlilegum heilbrigðum viðmiðunarhópum yfir í sjúklinga með CHB og skorpulifur og var að lokum hæst í HCC.Rannsóknir á tjáningu circSMARCA5 í blóðvökva sjúklinga með HCC hafa sýnt fram á versnandi hnignun á tjáningu í HCC, allt frá lifrarbólgu til skorpulifur og forkrabbameinsskemmdir.87 Greining á ROC ferlum staðfesti möguleika þessara circRNAs til að greina sjúklinga með lifrarbólgu eða skorpulifur frá þeim sem eru með HCC, sérstaklega þá sem eru með AFP gildi undir 200 ng/ml.Að auki greindi Zhu 13.617 hringlaga RNA í plasmasýnum frá HBV tengdum HCC sjúklingum og staðfesti að 6 hringlaga RNA voru tjáð á mismunandi hátt í HCC og HBV tengdum skorpulifur, sem bendir til þess að cRNA gæti verið gagnlegt.merki fyrir snemmtæka skimun á áhættuhópum eins og þeim sem tengjast lifrarsjúkdómum, mænusjúklingum.88
Exosomes eru himnublöðrur 40–160 nm í þvermál;margar innanfrumublöðrur renna saman við frumuhimnuna og losna út í utanfrumu fylkið.Þau innihalda marga virka þætti, þar á meðal lípíð, prótein, RNA og DNA, og gegna lykilhlutverki í samskiptum milli frumna, bæði HCC og non-HCC fruma.89,90 Exosomes stjórna framvindu HCC með því að virkja lifrarfrumna trefjafrumur og stjörnufrumur, ónæmisfrumur, eðlilegar lifrarfrumur og HCC frumur.91 Í örumhverfi æxlis mynda æxlisfrumur mikinn fjölda exósóma sem berast frá krabbameinsfrumum til óþroskaðra frumna, sem aftur taka þátt í krabbameinsmyndun, niðurbroti og frumuboðum.92 Rannsóknir hafa sýnt að exósóm geta flutt krabbameinsgen til eðlilegra frumna meðan á meinafræðilegum ferlum stendur, sem getur verið einn af leiðum æxlisinnrásar og meinvarpa.93 Hlutverk exósóma í framgangi krabbameins getur verið kraftmikið og sértækt fyrir krabbameinstegund, 89 Exosomes geta verið innbyrðis af aðliggjandi eða fjarlægum frumum til að stjórna mörgum markgenum í viðtaksfrumum sem geta tekið þátt í samskiptajónum milli frumna og samskiptum milli frumna og örumhverfis. miðla frumuboðum og efnaskiptum.94 Eiginleikar og kraftmiklar breytingar á flutningssameindum utanafbrigðis endurspegla beinlínis eiginleika og kraftmiklar breytingar æxlisfrumna í móðurkviði,95 sem einnig er grundvöllur notkunar á frumum við greiningu og horfur á krabbameini, sem og til að spá fyrir um svörun einstaklinga við krabbameinsmeðferð. ..96
Hefðbundnar rannsóknarstofuaðferðir til að einangra og greina exosomes eru flóknar, fjölþrepa og tímafrekar, þar á meðal ofurskilvindu, síun, stærðarútilokunarskiljun, ónæmissæknihreinsun, Western blotting, ensímtengd ónæmissogsgreining (ELISA), PCR og flæðisgreining.smækkuð kerfi og lab-on-a-flís pallur sem nota ör/nanotækni eru víða þróuð fyrir hraðvirka, þægilega einangrun exósóma á staðnum.Nanoparticle tracking analysis (NTA) er mikið notuð aðferð til að einkenna stærð og styrk exósóma, þar á meðal aðferðir eins og segulmagnaðir nanóagnir og fjölhýdroxýalkanóöt.Örflæðis- og rafefnafræðilegar aðferðir geta einnig fljótt greint exósóm í mikilli uppskeru.
Exosomal prótein eru mikilvæg merki fyrir greiningu á HCC.Í Arbelaiz rannsókninni var magn 98 RasGAP SH3 bindandi próteina (G3BP) og fjölliða immúnóglóbúlínviðtaka (PIGR) marktækt hækkað í HCC-afleiddum exósómum, og möguleg samanlögð virkni próteinanna tveggja var betri en AFP.Ofhleðsla járns er mikilvægur þáttur sem stuðlar að þróun HCC.Tseng greindi frá því að hepcidin gæti gegnt lykilhlutverki í ónæmi gegn HCC.99 Exosomes úr sermi HCC-sjúklinga voru með marktækt hærra afritafjölda hepcidin mRNA afbrigða en heilbrigðir hliðstæða þeirra, sem bendir til þess að hepcidin gæti verið ný greinandi lífmerki fyrir HCC.14-3-3ζ próteinið í exósómum sem framleitt er af 100 HCC getur dregið úr virkjun T-frumna, fjölgun og aðgreiningu og getur framkallað umbreytingu T-frumna í reglubundnar T-frumur, sem leiðir til eyðingar T-frumna.101 Þetta er stutt af nokkrum rannsóknum sem rannsaka undanskot æxla frá ónæmiseftirliti, 102 sem getur stuðlað að HCC æxlismyndun.
Auk nærveru ecRNA í blóðvökva eða sermi, er hægt að nota RNA-auðgað exósóm fyrir óífarandi rauntíma stigun í snemma æxlisskimun og til að ákvarða æxlisþróun og svörun við meðferð.Magn exosomal miRNA-21 í blóðsermi í HCC hópnum var 2,21 sinnum hærra en í CHB hópnum og í HCC hópnum var það 5,57 sinnum hærra en í heilbrigðu þýðinu.Í Wang rannsókninni jók exósóm marktækt HCC samanborið við skorpulifursjúklinga með AUC gildi upp á 0,83 (95% CI 0,74–0,93) og 0,94 (95% CI 0,88–1,00).104 Gögnin sem fengust útskýrðu þátttöku sérstakra utanaðkomandi farmsameinda í stjórnun á krabbameinsmyndun og framvindu HCC.105 Sermistjáning miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 og miR-26a er í samræmi.og meinvörp, og magn miR21 var mun hærra hjá HCC sjúklingum en heilbrigðum viðmiðunarhópum og einnig hjá CHB sjúklingum.102 LncRNA hafði hugsanlegt greiningargildi í HCC.Rannsóknir hafa sýnt að exósóm úr sermi HCC sjúklinga hafa marktækt hærra magn af LINC00161, LINC000635 og lncRNA sem virkjast með því að umbreyta vaxtarþátt-β en hjá sjúklingum án HCC, og þessi lncRNA eru sterk tengd TNM stigi og æxlisrúmmáli.110 Conigliaro o.fl.CD90+ exósóm reyndust tjá mikið magn af lncRNAH19, sem jók verulega losun æðaþelsvaxtarþáttar (VEGF) og framleiðslu VEGF-R1 viðtaka, og örvar þar með æðamyndun.93 CircRNAs eru önnur tegund af exosomal ncRNAs - tjáð á lægra en stöðugu magni yfir tegundir, circRNAs sýna einnig sérhæfni fyrir frumugerð, vefjagerð, þroskastig og stjórnunarvirkni.111 circRNAs eru greinandi lífmerki fyrir snemma og lítið ífarandi krabbamein.112 Nýlegar klínískar rannsóknir hafa sýnt að sérhæfni einstakra miRNAs við að spá fyrir um HCC er ekki tilvalin.Þess vegna getur flókin uppgötvun með því að nota margar greiningar (td miR-122 og miR-48a ásamt AFP) bætt greiningu á snemmbúnum HCC og aðgreiningu HCC frá skorpulifur.100
Sjúklingar með CHB og skorpulifur eru algengasti áhættuhópurinn fyrir að fá HCC.Fyrir áhættuhópa, þegar viðvarandi veirufræðileg svörun hefur verið náð, ætti að þróa hagkvæma eftirlitsstefnu sem byggir á HCC áhættu og snemmtæk skimun er lykillinn að því að bæta greiningu og meðferð á HCC með háu kostnaðarhagkvæmni hlutfalli2 ..Snemma skimunaraðferðir fyrir krabbameini hafa margar takmarkanir: árangursríkar snemmskoðunaraðferðir hafa ekki verið þróaðar fyrir flestar tegundir krabbameins og fylgið er yfirleitt lítið.Í samanburði við hefðbundnar snemma skimunaraðferðir hefur fljótandi vefjasýnistækni augljósa kosti: Auðveld sýnatöku, panrac uppgötvun, góðan endurgerðanleika sýna og skilvirk svörun við misleitni æxlis.Í ljósi kostnaðarhagkvæmni aðferðanna sem tengjast fljótandi vefjasýni hefur notkun þeirra við HCC skimun ekki verið prófuð reglulega.Þrátt fyrir framfarir í nákvæmri uppgötvun á sameindastigi er kostnaðarsamt að greina Vökvasýni hjá marksjúklingum, sem takmarkar víðtæka notkun þess samanborið við sérstakar myndgreiningaraðferðir eins og ómskoðun og segulómun.113.114 Hins vegar sýndi fyrri rannsókn að fljótandi vefjasýni sýndi verulegan ávinning hvað varðar gæðaleiðrétt lífsár (QALYs).115 Einnig hefur verið sýnt fram á ávinning af fljótandi vefjasýni í byrjun krabbameins í maga og nefkoki.116.117 Núverandi skoðun er sú að fljótandi vefjasýni geti verið viðbót við lífmerki í sermi og geislaskoðun við uppgötvun og greiningu æxla.117 118
Samkvæmt núverandi bókmenntum hefur vökvasýnatækni sýnt marktækt hærra næmi og sérhæfni við snemmbúna skimun á áhættuhópum fyrir lifrarkrabbameini.Burtséð frá tegund vökvasýna getur það greint HCC frá áhættusömum einstaklingum án HCC, sem bendir til mikilvægis snemmskoðunar þar sem munur á áhættuhópum og heilbrigðum einstaklingum er augljós.ctDNA hefur stuttan helmingunartíma og hægt er að nota það til að greina HCC, þannig að allar breytingar á æxlisafleiddu cDNA geta gefið rauntíma vísbendingar um framvindu æxla, sérstaklega fyrir lítil æxli.Mikið magn ctDNA gefur til kynna þróun og útbreiðslu krabbameins og er snemma vísbending um framvindu og endurkomu.Að auki geta sjúklingar, miðað við niðurstöður ctDNA, fengið einstaklingsmiðaða meðferð og eftirfylgni.119 Sérstakir metýlunarstaðir geta verið betri merki en AFP fyrir snemma greiningu á HCC og skorpulifurhnúðum.Í skurðtækum tilfellum af HCC er hátt magn cDNA vísbending um innrás í smáæðum og endurkomu eftir aðgerð og meinvörp.Breytingar á fjölda eintaka tengjast lifun sjúklinga með HCC.Gera má ráð fyrir að cDNA mat geti átt þátt í heildarmeðferð HCC og cDNA getur þjónað sem áhrifaríkur vísbending um meðferðarmótun.Merki sem byggjast á sérstökum erfðastökkbreytingum í ctDNA hafa verið samþykktar með klínískum leiðbeiningum til að spá fyrir um virkni og fylgjast með lyfjaónæmi.ctDNA próf getur verið gagnlegasta fljótandi vefjasýnistæki til að skima snemma.CTCs gegna einnig lykilhlutverki í snemma skimun á áhættuhópum HCC.Ýmis merki um HCC-tengd CTCs eru sérstaklega mikilvæg við upphaf, þróun og endurkomu HCC.Sem himnublöðrur taka exósóm þátt í samskiptum milli frumna, sérstaklega í HCC frumum.MíkróRNA í hringrás eru stöðug í blóði og geta því verið gagnlegri fyrir snemmtæka skimun á HCC.Smám saman komu í ljós utanaðkomandi prótein og RNA-ríkar exósóm, og spá um virkni þeirra fyrir HCC var staðfest.Athyglisvert er að mismunandi orsakir HCC geta einnig tengst mismunandi stökkbreytingum, þannig að við getum valið mismunandi lífmerki fyrir snemmskoðun byggt á mismunandi orsökum HCC.120
Hins vegar eru núverandi vökvavefjasýnisaðferðir vafasamar hvað varðar stöðugleika og geta ekki sjálfstætt framkvæmt snemmtæka skimun eða eftirlit með HCC, en getur samt bætt einstaka skimun og greiningu.121 Sem tegund af vökvasýni, hefur uppgötvun og myndgreining á ctDNA, CTC, cfRNA og exósóm-tengdu AFP eða PIVKA-II vænlega notkun við snemmtæka greiningu og horfur á HCC.Hins vegar á eftir að skýra nákvæmlega hvernig ctDNA losun í blóðið er.Að sýna grunn líffræðilega eiginleika ctDNA getur auðveldað notkun þess sem merki.Lítið magn ctDNA í blóðrásinni og strangar kröfur um meðhöndlun sýna eru áskoranir fyrir klíníska innleiðingu cDNA uppgötvunar í HCC.Að auki hafa erfðafræðilegar stökkbreytingar ekki sérstaka eiginleika sem leyfa nákvæma auðkenningu krabbameinsvalda.Þar sem mörg erfða- og líkamsafbrigði eru einnig til staðar í venjulegum vefjum, geta erfðafræðilegar stökkbreytingar sem auðkenndar eru með vökvasýni verið takmarkaðar gagnsemi við snemmtæka skimun fyrir HCC.122 Takmarkanir vel skilgreindra gagnlegra genamarka og lífmerkja sem hjálpa til við að aðgreina cDNA frá DNA sem ekki er æxli eru mikilvægustu atriðin í notkun cDNA.skortur á notagildi viðkvæmra og sértækra merkja til að greina CTC.Aðeins lífvænlegar frumur með meinvörpum fannst og ákjósanleg samsetning CSC auðgaðra merkja var óljós.Einangrun CTCs til ræktunar og mat á stökkbreytingarsniði þeirra er líka krefjandi verkefni.Vegna vandamála við auðkenningu, einangrun og hreinsun exósóma er sérstakur sameindakerfi enn óljóst og fyrri rannsóknir á verkunarháttum exósóma og HCC hafa ekki verið ítarlegar og hvernig miRNA, lncRNA og prótein eru flokkuð í exósóm. , og það er ekki ljóst hvort upptaka exósóma er ákveðin ferli.Notkun exósóma til greiningar og meðferðar á HCC er enn á forklínísku stigi.Skortur á stöðlun á fljótandi vefjasýnisaðferðum, svo sem tegund slöngna sem notuð eru til að safna blóði, blóðrúmmáli, geymslu og greiningu sýna, einangrun og auðgun, getur komið í veg fyrir notkun þeirra í venjubundnum klínískum framkvæmdum vegna mismunandi starfsvenja milli læknastofnana.Á eftir að kanna virkni fljótandi vefjasýnis í snemmtækri skimun, greiningu, virknimati og spá um HCC, sérstaklega fyrir áhættuhópa.Tækni fyrir fljótandi vefjasýni hefur mikla möguleika og er búist við að hún verði mikið notuð í klínískri framkvæmd lifrarkrabbameins í náinni framtíð.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL o.fl.Alþjóðleg krabbameinstölfræði 2020: GLOBOCAN metur nýgengi og dánartíðni af völdum 36 tegunda krabbameins í 185 löndum.CA Krabbamein J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Höfuðstöðvar heilbrigðisnefndar ríkisins.Viðmiðanir fyrir greiningu og meðferð á frumkomnum lifrarkrabbameini (2022 útgáfa) [J].Journal of Clinical Liver Diseases, 2022, 38(2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, o.fl.Leiðbeiningar um greiningu og meðferð lifrarfrumukrabbameins (2019 útgáfa).Lifrarkrabbamein.2020;9(6):682-720.Doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, o.fl.Leiðbeiningar um klínískar framkvæmdir fyrir lifrarfrumukrabbamein: Japanese Society for Lifrar Diseases, 2017 (JSH-HCC 4th guidelines), 2019 uppfærsla.Lifrarsjúkdómalón.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Vökvasýni í langvinnum lifrarsjúkdómum.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Vökvasýni úr brjóstakrabbameini: markviss endurskoðun.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Eftirlit með lifrarfrumukrabbameini: núverandi bestu starfsvenjur og framtíðarleiðbeiningar.Meltingarlækningar.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. European Research Association L, European Organization R, C Therapeutics.Klínískar leiðbeiningar EASL-EORTC: meðferð á lifrarfrumukrabbameini.J Heparín.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK o.fl.Samsett greining á AFP og HCCR-1 sem gagnlegum sermisfræðilegum merkjum í litlum lifrarfrumukrabbameini: tilvonandi hóprannsókn.Dis Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, o.fl.Mismunandi tjáning á plasma microRNA-125b í lifrarbólgu B veiru tengdum lifrarsjúkdómum og greiningarmöguleikar lifrarbólgu B veiru af völdum lifrarfrumukrabbameins.Geymir fyrir lifrarsjúkdóma.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. o.fl.Líffræði og mikilvægi alfa-fótópróteins í lifrarfrumukrabbameini.Lifur int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, o.fl.Klínískar leiðbeiningar um meðferð á lifrarfrumukrabbameini á Asíu-Kyrrahafssvæðinu: 2017 uppfærsla.Alþjóðastofnun um lifrarsjúkdóma.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei o.fl.Greiningargildi PIVKA-II í sermi eitt sér eða ásamt AFP hjá kínverskum sjúklingum með lifrarfrumukrabbamein.Dis Mark.2021;2021:8868370.Doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. o.fl.Lungnakrabbamein sem ekki er af smáfrumugerð en vefjasýni úr plasma vökva: nær æxlinu!klefi.2020; 9(11).doi: 10.3390/cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Vökvasýni: núverandi staða og framtíðarhorfur.Meðferð Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.Doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, o.fl.Vökva-undirstaða krabbameinslífsýni: fjölþætt greiningartæki í klínískri krabbameinsfræði.Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.Doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Kjarnsýrur í plasma manna.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Ítarleg greining á DNA æxlis í blóðrás með brotastærðargreiningu.Vísindi þýða læknisfræði.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. o.fl.Lengd DNA búta í hringrás æxlis.PLOS gen.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. DNA í hringrás æxlis: efnilegur lífmerki í vökva-undirstaða krabbameinsvefsýni.markæxli.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ o.fl.Uppgötvun æxlis-DNA í blóðrás á fyrstu og seinustu stigum illkynja sjúkdóma í mönnum.Vísindi þýða læknisfræði.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Vökvasýni fyrir stökkbreytingarspárgreiningu á föstu krabbameini: sjónarhorn meinafræðings.J Líftækni.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, o.fl.Snemma uppgötvun æxlis með DNA skimun í blóðvökva: efla eða von?Belgísk klínísk lög.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Áhrif lifrarbólguveiru og öldrun á DNA metýleringu í lifrarkrabbameinsmyndun í mönnum.Vefjameinafræði.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647


Birtingartími: 23. september 2022